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大肠杆菌细胞破碎的方法

最常用的办法是SDS法，在反应体系中加入终浓度约为1%的SDS37度水浴1小时就可以完成大肠杆菌的裂解。现在手提细菌的基因组DNA基本上就是这个办法，具体步骤在分子克隆和精编分子生物学实验指南上都有，是最经典的方法。SDS是一种阴离子去垢剂，能够破坏细菌的细胞壁和细胞膜。

研究设计选取大肠杆菌E. coli菌株作为实验对象，使用超声波破碎机XYZ-2000和高压均质机ATS AH-BASIC 30进行破碎处理。通过显微镜观察和细胞内生物大分子释放量的测定，评估破碎效果。

您是想问噬菌体侵染大肠杆菌实验用了什么离心方法？该实验常用的离心方法是常规离心和超速离心。常规离心是指将样品放入离心管中，并以相对较低的离心力（通常为几千g）进行离心。这种方法适用于分离细胞碎片、细胞器、大分子物质等。

酸碱处理：调节pH值，改变蛋白质的荷电性质，提高产物的溶解度。 （2）化学试剂处理：用表面活性剂或有机溶剂（甲苯）处理细胞，增大细胞壁的通透性，降低胞内产物的相互作用，使之容易释放。

BL21是一种常用的大肠杆菌表达宿主菌株，下面是一般的BL21表达步骤： 转化：将目标表达质粒（含有目标基因）转化到BL21细胞中。这可以通过热冲击法或电穿孔法等方法进行。 选择：在LB琼脂平板上培养转化后的细胞，并添加适当浓度的抗生素，如氨苄青霉素或卡那霉素。

机械法：主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法，常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。常用的细胞破碎方法有反复冻融法、超声破碎法、酶处理法、自溶法和表面活性剂处理法 。细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤，破碎方法的得当与否，直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。